6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit 返回列表頁

描述：本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉錄預混體系 5×Fast RT MasterMix 進行 RNA 的反轉錄反應，使用時只需加入模板、 引物和 RNase Free H2O 即可，大大簡化了操作過程、提高 了效率、減少了操作過程中的人為誤差。 該預混體系包含快速 MLV7 反轉錄酶、dNTP、反應 Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的 MLV7 反轉錄酶 具有以下特性：RNase H 活性缺失，從而避免反轉錄過程中 降解 RNA；經過突變文庫篩選，使得其熱穩(wěn)定性更強，可耐 受 50℃ 高溫反應，在 60℃ 條件下仍然具有 30%以上活性， 利于打開 RNA 二級結構，從而提高復雜 RNA 模板的擴增性 能；含有快速合成結構域，將 MLV 的延伸速度提高了 3-4 倍，因此適用于快速反轉錄反應；優(yōu)化的反轉錄 Buffer 系統(tǒng)， 可以獲得更高產量的 cDNA，從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。 合成的第一鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、 PCR 擴增、Real-Time PCR 反應等。

應用：
（1）該制品可有效反轉錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
（2）該制品不可反轉錄 microRNA
組分

儲存：請置于-20°C，可保存 3 年；避免反復凍融。
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
5×Fast RT MasterMix 4 μl
*20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*注：反轉錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.反應程序
 50°C 5 min（cDNA 合成）
 95°C 1 min（失活 MLV）
3. 采用 0.25-2μl 反轉錄產物，作為后續(xù)定量 PCR 或 PCR的擴增模板即可。